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N-糖基化修饰组
N-糖基化(N-Glycosylation)是最重要的蛋白质翻译后修饰之一,主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用,参与细胞与细胞的连接、受体配体的相互作用、免疫应答、细胞凋亡及各种发病机理等生物学过程。拜谱生物N-糖基化蛋白质修饰组,利用凝集素富集N-糖基化肽段,高通量,高分辨,可分析不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路,以及候选糖蛋白标志物的筛选等。
N-糖基化修饰组
原理/实验流程
糖份子个人的复杂化性和成千上万N-glycoproteins低把你想表达出来平均水平让 对N-glycosylation格局的研究方法步骤的描素特别不便。在检验低丰度的N糖基化体现球核球蛋白质质酶酶或肽段时,当中掺入海量未体现的球核球蛋白质质酶酶肽断,这很会将低丰度的糖基化体现球核球蛋白质质酶酶肽段的4g信号遮住。凝素亲和法是现在糖球核球蛋白质质酶酶质组学中应用软件比较多泛的分开丰度方法步骤。凝集素(lectin)一类糖联系球核球蛋白质质酶酶质,能专业判断某段唯一性格局的单糖或聚糖中相关的糖基队列而与之联系,因此与糖链可逆转非共价联系,糖球核球蛋白质质酶酶或糖肽被凝集素猎取往后,一般而言用相关的单糖使用价格竞争联系凝集素将糖球核球蛋白质质酶酶或糖肽洗刷了。 淀粉酶质过程酶解后充分采取凝集素(lectin)聚集N-糖基化肽段,在最后用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中割除连接方式在天冬酰胺残基(Asn)上的糖链。该净化处理因为Asn大分子式式量扩大2.9890Da。在最后用高精美LC-MS质谱仪判断脱糖后的肽段,凭借索引数据资料库,明确脱糖后大分子式式量与之理论上大分子式式量的变化无常同时糖基化体现肽段的编码序列,然而认定该淀粉酶质的N-糖基化位点。N-糖基化位点认定以后,再充分采取label-free的原理图对其进行酶联免疫法解析。

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产品特色
  • 01大规模的蛋白质组N-糖基化位点的鉴定与分析

  • 02采用凝集素特异性富集N-糖基化肽段
  • 03高通量,高分辨

应用方向
  • 01
    不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路分析

  • 02
    筛选候选糖蛋白标志物


送样建议
样本类型 常规送样量
植物叶片 湿重≥3g
植物根茎、木质部、韧皮部等 湿重≥5g
细胞样品 细胞量湿重≥5*10^7
组织样品 人、动物、微生物湿重≥50mg
体液样品 血清、血浆体积≥200μl,脑脊液≥500μl,尿液≥1000μl
参考文献
1、Zielinska DF, Gnad F, Schropp K, Wi?niewski JR, Mann M. Mapping N-glycosylation sites across seven evolutionarily distant species reveals a divergent substrate proteome despite a common core machinery. Mol Cell. 2012;46(4):542-548. doi:10.1016/j.molcel.2012.04.031
涉及到的品牌
蛋白鉴定,蛋白质组,多肽组学,靶向蛋白质,修饰蛋白质组,代谢组,非靶代谢,靶向代谢,医学全靶代谢,植物广靶代谢,测序,转录组,基因组,微生物组,ncRNA,IP-seq,生信分析
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